Реакция на пестициды 

Рясковые впервые как фитотесты стали использоваться для тестирования загрязнения воды пестицидами. В качестве корректной оценки использовали показатели: коэффициент роста, длину и количество корней, площадь листеца, реакцию фотосинтеза и другие физиологические и морфологические характеристики .

В ходе поставленных экспериментов по способности к росту и выживаемости в условиях воздействия разных препаратов были выявлены следующие закономерности: ряска малая проявляет внезапную и сильную реакцию, продолжающуюся некоторое время, после чего перестает реагировать на загрязнитель, поэтому ее можно отнести к биоиндикаторам 1 типа (биоиндикатор проявляет внезапную и сильную реакцию) по классификации ; ряска тройчатая реагирует на загрязнитель более интенсивно, однако, дистигнув максимума реакция постепенно затухает и поэтому может быть отнесена к биоиндикаторам 4 типа (под влиянием загрязнителя реакция биоинидикатора постепенно становится все более интенсивной, однако достигнув максимума постепенно затухает) ; у многоренника после немедленной, сильной реакции наблюдается ее затухание, сначала резкое, затем постепенное, что характерно для биоиндикаторов 3 типа (после немедленной, сильной реакции у биоиндикатора наблюдается ее затухание, сначала резкое, затем постепенное).

Таким образом, на основании проведенных наблюдений исследуемые виды можно идентифицировать как биоиндикаторы различных типов.

Использование таких качественных показателей как специфическая окраска и специфическая реакция дает возможность оценить специфическую индивидуальную реакцию биоиндикаторов на каждый отдельный гербицид. Для показателя специфическая окраска нами были выделены следующие признаки: пожелтение листецов (смена зеленой окраски желтой) встречается как реакция практически на все гербициды; побурение листецов (смена зеленой окраски на бурую) (Рис. 1 -7). наблюдается у всех видов-тестеров как реакция на гербицид раундап; сохранение неизменной окраски тест-объекта при всех концентрациях гербицида бурифена.


Рис. 1. Lemna minor. Нурел - 0,04 мг/л (реакция на 2 сутки). Листецы собраны в группы, светло-зеленые. 40% отмирают.

Рис. 2. Lemna minor. Децис - 0,01 мг/л (реакция на 2 сутки). Листецы светло-зеленые. 30% отмирают.

Рис. 3. Lemna minor. Суми - L. - 0,03 мг/л (реакция на 2 сутки). Листецы светло-зеленые. 40-50% отмирают. Потеря окраски идет от переферии к центру.

Рис. 4. Lemna minor. Антио - 0,005 мг/л (реакция на 2 сутки). Проникновение препарата идет по апопласту, вызывает посветление всего листеца. 50% листецов зеленые, 50% потеряли окраску.

Рис. 5. Lemna minor. Дерозал - 0,12 мг/л (реакция на 2 сутки). Листецы зеленые, собраны в группы. Просветление тканей идет вдоль сосудистых пучков, листец становится "перфорированным".

Рис. 6. Spirodela polyrrhiza. Дерозал - 0,12 мг/л (реакция на 2 сутки). Листецы светло-зеленые. 30% отмирают. Просветление тканей идет вдоль сосудистых пучков, листец становится "перфорированным".

Рис. 7. Lemna minor. Омайт - 0,1 мг/л (реакция на 2 сутки). Листецы вялые, отмирает 40%.

Кроме этого были выделены следующие типы специфической реакции: сетчатое окрашивание (снимался при учете показателя процент повреждения методом витального окрашивания) характерно для всех концентраций градила и харнеса у всех видов-индикаторов;

А Б В

Рис. 8. Применение метода витального окрашивания для изучения степени фитотоксичности гербицидов на примере ряски малой (Lemna minor). Примечание: красным цветом обозначены мертвые (поврежденные) клетки А - "сетчатое" окрашивание, связанное с проникновением красителя по апопластическим сетям; Б - "сетчатое" окрашивание, сочетающееся с повреждением листеца по краям, а также с частичным повреждением молодого листеца; В - сочетание "сетчатого" окрашивания с локальным проникновением красителя.

отмирание с краев листеца, увядание листецов - на препараты акрил - М и базагран; рассоединение листецов из групп - эта реакция наблюдается у ряски малой при концентрации 2,5 и 5,0 гербицида бурифен. Эти типы специфической реакции отражены в таблице 6.20.

На последнем этапе работы нам необходимы было провести анализ изменчивости всех имеющихся количественных признаков. В работах Ванга (Wang, 1991) были применены методы статистического анализа, где в основным фактором выступали ростовые процессы. В нашей работе были использованы методы многомерной ститистики, где исследовали влияние каждого фактора.

Таблица 1
Качественные показатели оценки специфической
индивидуальной реакции биоиндикаторов на пестициды
Признаки Г е р б и ц и д
1234567
Специфическая окраска
Пожелтение+++++++
Побурение-----+-
Сохранение зеленой окраски------+
Специфическая реакция
Сетчатое окрашивание++-----
Отмирание с краев, увядание---++--
Рассоединение листецов из групп------+
Примечание: 1) 1 - харнес, 2 - градил, 3 - поаст, 4 - акрил-М,
5 - базагран, 6 - раундап, 7 - бурифен;
2) + наличие реакции; - отсутствие реакции.

Трехфакторный дисперсионный анализ изменчивости коэффициентов мгновенного роста позволил выявить статистически достоверные различия по факторам вид, гербицид и концентрация с долями в общей дисперсии 61,9 и 10% соответсвенно. Взаимодействие факторов не учитывалось, так как данные были организованы в бесповторный дисперсионный комплекс. Как видно из результатов дисперсионного анализа, по данному признаку удалось выявить высокую видоспецифичность (61,0%), что дает основание для исследования данного показателя для каждого вида отдельно.

Таблица 2
Результаты трехфакторного дисперсионного анализа
изменчивости коэффициента мгновенного роста.
Изменчивость SS df mS Доля %
Общая0,514169 100
Между концентрациями0,063940,0169
Между видами0,242510,242561
Между гербицидами0,07960,013210
Остаточная0,1287580,002220

Затем нами была получена таблица средних значений по показателю "коэффициент мгновенного роста" (табл.3). Это показалось интересным, поскольку для этого признака по факторам "вид", "гербицид" и "концентрация" были обнаружены статистически достоверные различия.

Таблица 3
Средние значения коэффициентов мгновенного роста для
разных видов, концентраций и препаратов
Уровни факторов Объем Среднее значение Стандартная ошибка 95% -ный довери- тельный интервал
(нижний предел)
95% -ный доверит- ельный интервал
(верхний предел)
Концентрация
1140,130,020,110,16
2140,120,020,100,15
3140,120,020,090,14
4140,100,020,080,13
5140,050,020,020,07
Вид
Ряска малая350,160,010,150,18
Ряска тройчатая350,050,010,030,06
Гербицид
A100,060,020,030,09
B100,070,020,040,10
C100,140,030,110,17
D100,150,040,120,18
E100,090,030,060,12
F100,130,040,100,16
Примечание: 1) цифрами обозначены концентрации препаратов в порядке возрастания
(1 - самая низкая, 5 - самая высокая);
2) буквами латинского алфавита обозначены
А - градил, В - харнес, С - поаст, D- базагран, E - акрил-М, F- раундап, G - бурифен.

Из таблицы 3 видно, что различия наблюдаются только между самой низкой и самой высокой концентрациями; налицо различия между видами, причем наибольшим коэффициентом мгновенного роста характеризуется ряска малая; гербициды градил и харнес обладают максимальной фитотоксичностью (торможением прироста листецов), для раундапа и бурифена характера средняя фитотоксичность, поаст, акрил-М и базагран меньше всего тормозят прирост. Появление этих трех групп можно с вязывать как со степепью фитотоксичности данных препаратов, так и с основными требованиями, предъявляемыми к гербицидам - степенью специфичности при уничтожении сорных растений в агроценозе. (К. Феуткс., 1985)

Двухфакторный дисперсионный анализ выявил, что в структуре изменчивости эпистрофных хлоропластов представлена только дисперсия по фактору - гербицид. Различия между видами, а также эффект взаимодействия признаны статистически недостоверными.

Результаты трехфакторного дисперсионного анализа вскрыли статистически достоверные различия по факторам концентрация и гербицид с долями 15 и 23% соответственно, был выявлен и эффект взаимодействия с долей 34%. По фактору вид - статистически достоверных различий обнаружено не было, не было выявлено и наличия эффектов взаимодействия: концентрация-вид, гербицид-вид, а также концентрация - гербицид - вид.

По показателям процент повреждения статистически достоверных различий выявлено не было, что может быть связано как со сходным незначительным "повреждающим действием" всех гербицидов там и с тем, что концентрации гербицидов были, видимо, далеки от их ПДК для данных видов.

Выводы:

  1. Несомненным преимуществами тест-объекта обладает ряска малая - вид, очень чувствительный к загрязнению. Таким образом, ряску малую можно отнести к биоиндикаторам 1 - типа, ряска тройчатая относится к биоиндикаторам 4-го типа, накапливающим загрязнители, и только затем реагирующим на них, многокоренник можно отнести к биоиндикаторам 3- го типа, хорошо реагирующим на изменение концентрации загрязнителя, но гибнущим при его высоких концентрациях.
  2. Видоспецефичность реакции представителей семейства рясковых на гербициды обнаружена для признака "коэффициент мгновенного роста". Доля влияния межвидовых различий составляет 61% от общей изменчивости.
Главная       Биотестирование почвы Методики биотестирования
Краснодар, 2000